用一恒DHP- 9272对菌体生长营养成分分析

1 材料与方法 

1.1 材料与试剂 

红酵母，吉林省农业科学院食品微生物实验室 在吉林省长春市净月区的土壤中分离鉴定提供，并 保藏命名为 CCYZ116。 斜面培养基：200 g/L 马铃薯，20 g/L 葡萄糖， 20 g/L 琼脂。 液态发酵培养基：10 g/L 蛋白胨，10 g/L 酵母浸 粉，40 g/L 葡萄糖。装液量为 50 mL 于 250 mL 三角 瓶中。 固态培养基：将酒糟、豆粕和麸皮研 磨 至 40 目，酒糟∶豆粕∶麸皮配比为 1∶3∶2，按比例 称好培养基，均匀搅拌，分别取 50 g 置于 500 mL 烧 杯中，封口包扎，于 121 ℃下灭菌 40 mi。 

1.2 仪器与设备 

MLS- 3780 型高压蒸汽灭菌锅，日本 Sanyo 公司 产品；HZQ- X100 型全温振荡培养箱、DHP- 9272 型 电热恒温培养箱，上海一恒科技有限公司产品；Cary 300 型紫外可见光分光光度计，美国 Varian 公司产 品；Evolution RC 型高速冷冻离心机，美国 Thermo Stovall 公司产品；DL- CJ- 2ND 型超级洁净工作台， 北京东联哈尔仪器制造有限公司产品。 

1.3 方法 

CCYZ116 种子培养：在 CCYZ116 斜面上挑取菌 落，接种于液体培养基中。温度为 30 ℃，以转速 230 r/min 振荡培养 48 h。 接种量不同处理： （1） 空白组。接入 15 mL 灭菌蒸馏水为空白对照，于 30 ℃下培养 72 h。 （2） 原液培养组。将 15 mL CCYZ116 液体发酵 液离心，弃上清，用 15 mL 灭菌蒸馏水水重悬接入 固体培养基中，于 30 ℃下培养 72 h。 （3） 2.5 倍浓缩培养组。将 37.5 mL CCYZ116 液 体发酵液离心，弃上清，用 15 mL 的灭菌蒸馏水水 重悬接入固态培养基，于 30 ℃下培养 72 h。 （4） 5 倍浓缩培养组。将 75 mL CCYZ116 液体 发酵液离心，弃上清，用 15 mL 的灭菌蒸馏水水重 悬接入固态培养基，于 30 ℃下培养 72 h。

2 结果与分析

5 倍浓缩组的培养基中的活菌数最 高达到了 3.64×108 CFU/g，菌体生物量最高达到 2.644 g/L；2.5 倍浓缩组的活菌数为 3.60×108 CFU/g， 菌体生物量最高达到了 2.699 g/L，两组之间没有显 著差异。但与原液培养组和空白组比较差异显著 （p<0.05）。结果表明，接种量的增加，显著提高了 培养基的活菌数量和菌体生物量，但浓缩倍数达到 2.5 倍时对活菌数量和菌体生物量的影响已饱和，不 是接菌量越大活菌数量就越高。在实际发酵应用中 可适当加大接菌量，达到饱和点后无需再继续加大 接菌量，既可提高发酵效率，又能降低成本。

3 结论 

利用从土壤中分离出一株红酵母的发酵作用来增 加农林废弃物的营养成分。研究不同接种量的 CCYZ116 固态发酵后农林废弃物培养基中菌体生长和 营养成分的变化。2.5 倍浓缩组与空白组、原液组相比 显著地提高了培养基中活菌数 （3.64×108 CFU/g） 和 生物量 （2.699 g/L，p<0.05）。5 倍浓缩组的类胡萝卜 素含量 （713.22 μg/g） 和产量 （1 312.3 μg/L） 最高， 2.5 倍浓缩组的可溶性总糖最高达 5.433 g/100 g，原液 组的可溶性蛋白含量最高为 10.392 g/100 g（p<0.05）。 由此可见，提高红酵母的接种量，有助于提高 红酵母发酵产物的营养价值、提高发酵效率、降低 成本，为农林废弃物回收利用和红酵母实际应用的 进一步研究和开发提供了理论依据。

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