麦角硫因不能由动物机体或者人体自身合成,主要存在于一些细菌和真菌中。在合成麦角硫因的微生物中,杏鲍菇、金针菇等常见食用菌中麦角硫因的含量高且具有天然安全性,是制备麦角硫因的良好资源。上海一恒科学仪器有限公司发现目前,国内外对麦角硫因的研究多集中于功能研究,提取方面的报道一般为水或其它溶剂对常见食用菌的简单浸提。对于生物体内活性物质的提取,合适的工艺条件可大大提高目标产物的提取量,缩短提取时间,减少提取过程中对目标产物的损耗。而食用菌麦角硫因的得率亦会受溶剂、温度等因素的影响。因此,有必要对食用菌麦角硫因的提取工艺条件进行深入研究。本研究上海一恒科学仪器有限公司以杏鲍菇为对象,使用单因素实验和响应面实验对杏鲍菇中麦角硫因的条件进行优化,为杏鲍菇麦角硫因的开发和利用提供理论依据。
1 材料与仪器
杏鲍菇 取无虫害、无机械损伤、大小均一的样品用于实验,广东蓝田农业有限公司;麦角硫因标准品 美国 Sigma 公司;乙醇、甲醇、丙酮(分析纯),甲醇、乙腈(色谱纯) 广州丛源试剂公司。
LC2130 高效液相色谱仪 上海天美科学仪器有限公司;FD-1-50真空冷冻干燥机 天津比朗实验仪器制造有限公司;DHG-9420A电热恒温鼓风干燥箱 上海一恒科学仪器有限公司;MAS-Ⅱ微波萃取仪 上海新仪微波化学科技有限公司;低温连续相变萃取装置 珠海共同机械有限公司;JY92-2D超声细胞粉碎机 宁波新芝生物科技股份有限公司。
上海一恒DHG-9420A电热恒温鼓风干燥箱
1.2 干燥方式的选择
对照组:取100g新鲜杏鲍菇,使用粉碎机将其充分粉碎成粉末状,加入适量的70%乙醇与其充分混匀、溶解,接着8000r/min离心10min,取上清液用 70%乙醇定容,用HPLC法测定麦角硫因含量。
热风干燥:取100g新鲜杏鲍菇放置于烘箱中干燥至恒重(温度设置为50℃),然后使用粉碎机将其充分粉碎成粉末状,加入适量的70%乙醇与其充分混匀、溶解,接着8000r/min离心10min,取上清液用70%乙醇定容,用HPLC法测定麦角硫因含量。
真空冷冻干燥:取100g新鲜杏鲍菇置于超低温冰箱12h迅速降温冷冻后,进行真空冷冻干燥至恒重。然后使用粉碎机将其充分粉碎成粉末状,加入适量的70%乙醇与其充分混匀、溶解,接着8000r/min离心10min,取上清液用 70%乙醇定容,用HPLC法测定麦角硫因含量。
2干燥方式的选择
上海一恒科学仪器有限公司由图1可知,热风处理后提取得到杏鲍菇的麦角硫因含量为(0.11±0.02)mg/g湿重,显著低于其它两种处理方法;而新鲜杏鲍菇和经真空冷冻处理后的杏鲍菇干粉中麦角硫因含量分别为(0.21±0.01)mg/g、(0.20±0.02)mg/g湿重,二者无显著差异。利用热风干燥对样品进行干燥时,组织部的水分会迅速蒸发,这会对组织结构造成很大的破坏,因此热风干燥容易导致杏鲍菇中营养物质的损失。新鲜的杏鲍菇含水量高,易发生腐败变质,不耐贮藏,不适于工业生产。而使用真空冷冻处理后的杏鲍菇含水量降低,并且低温处理可减少营养成分的损失,接着对处理后的材料进行充分粉碎后,也可提高麦角硫因在溶剂中的浸出率。故采用真空冷冻干燥对杏鲍菇进行干燥处理。
图 1 干燥方式对麦角硫因含量的影响
3 结论
真空冷冻干燥对杏鲍菇中麦角硫因造成的损失很少,适用于对杏鲍菇进行前处理;采用经真空冷冻干燥后的杏鲍菇粉末作为原材料,运用单因素实验和响应面法对杏鲍菇麦角硫因提取工艺进行优化,确定液料比48:1、53%乙醇、微波条件(500W、65℃、5 min)、超声条件(450W、5min)为最佳工艺条件,该条件下可从杏鲍菇中提取得到麦角硫因(3.79±0.02)mg/g干重,与预测值误差在1%以内,得到的二次回归方程合理可靠,具有一定的可行性。本研究上海一恒科学仪器有限公司得到的提取方法可为食用菌中麦角硫因的提取提供参考,具有广阔的应用前景。