1 材料与方法
无水乙醇(分析纯)、氢氧化钠(分析纯):天津市致远 化学试剂有限公司;邻苯二甲酸氢钾(分析纯):天津市盛奥 化学试剂有限公司;酚酞(分析纯):天津市化学试剂三厂。MRS肉汤、MRS培养基:青岛日水生物技术有限公司; 筛选培养基(含有碳酸钙的MRS培养基):在MRS培养基 中加入3%的碳酸钙。ⅡS常压室温等离子诱变仪:无锡源清天木生物科技 有限公司;FA2014N分析天平:北京东南仪诚实验室设备有 限公司;LDZX-50KBS立式高压灭菌器:上海申安医疗器 械厂;HR40-A2生物安全柜:青岛海尔特种电器有限公司; MJX-100B-Z生化培养箱:上海博迅实业有限公司医疗设 备厂;PTX-FA210电子天平:福州华志科学仪器有限公司; SNB-1数字黏度计:上海天美天平仪器有限公司;FE28 Plus pH计:梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司;DHG-9140A 电热鼓风干燥箱:上海一恒科学仪器有限公司;TU-1810紫 外可见光光度计:北京普析通用仪器有限责任公司;FE20 PLUS pH计:梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司。
2 结果与分析
将菌株YL15 接入MRS肉汤液体培养基中,前0~6 h菌株YL15生长处于 延滞期,增长相对缓慢,OD600nm值变化波动很小;在6~14 h 菌株YL15增长迅速,OD600 nm值迅速增加,此时菌株YL15处 于对数生长期;在18~27 h后植物乳杆菌步入稳定期,27 h 后逐渐进入衰亡。在一定程度上乳酸菌菌株在不同生理状 态下对诱变的敏感程度不同,当乳酸菌菌株生长到对数期 时,其繁殖力强,生长速度迅猛,且菌种数量以一个稳定的 速率增长,对环境因素的影响更为敏感。在对数期进行诱 变,可以提高基因突变率和稳定遗传性[22]。因此,本试验对 处于对数生长期10 h时的菌株YL15进行诱变试验。
3 结论
通过以新疆乌鲁木齐农牧民家中采集的酸马乳中分离筛选出植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)YL15, 在确定工作气流量、电源功率、操作温度以及等离子体发射 源与菌悬液的距离后,经单因素试验确定在最佳诱变处理 条件为120 W照射100 s。利用筛选培养基及pH测定试验对 照射后挑选的33株突变菌株进行初筛,最后再通过产酸能力 测定试验确定目标菌株为YL15-4,其产酸量为15×10-3mol/L, 高于初始菌株的YL15产酸量的50%。突变菌株YL15-4遗 传性能稳定,最适生长温度为37 ℃,最适生长pH值为5.0。 植物乳杆菌在发酵制品、开发功能益生产品方面有更广阔 的应用前景。
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