恒温培养箱用于热病毒的抗病毒作用探讨

材料和方法

清开灵注射液购自吉林省集安 益盛药业；利巴韦林注射液购自杭州民生药业；细胞 生 长 液（10% FBS DMEM）：DMEM、FBS 购 自 Life Technologies；细胞维持液（2% FBS DMEM）；噻唑蓝 （MTT）购自Sigma；二甲基亚砜（DMSO）购自天津市富 宇精细化工有限公司；DENV-1核酸检测试剂盒购自 深圳澳东检验检测科技有限公司；病毒 RNA 提取试 剂盒购自QIAGEN公司。备 倒置显微镜（奥林巴斯，日本）、实 时荧光定量PCR（罗氏，美国）、恒温培养箱（上海一恒科技有限公司）、二级生物安全柜（Thermo Fisher Sci⁃ entific，美国），酶标仪（BioTek，美国）等。

结 果

病毒对照组的细胞存活率为 （49.4±4.5）%；病毒经稀释至 1/32（3.13 mg/mL）、1/64 （1.56 mg/mL）和 1/128（0.78 mg/mL）的利巴韦林处理 后，感染细胞的细胞存活率分别增加至（98.7±0.5）%、 （80.2±5.4）%和（77.5±2.7）%，与病毒对照组相比差异 有统计学意义（P<0.05），引起细胞病变效应明显减弱； 病毒经稀释至 1/64、1/128和 1/256的清开灵注射液处 理后，感染细胞的细胞存活率分别增加至（76.9 ± 3.5）%、（72.5±2.5）%和（63.0±1.5）%，与病毒对照组相 比差异有统计学意义（P<0.05）。清开灵注射液恢复细 胞存活率的能力不及利巴韦林，但与病毒对照组相比 细胞的存活率明显增加，病毒引起的病变效应降低。利巴韦林在稀释至 1/32（3.13 mg/mL）和 1/64 （1.56 mg/mL）浓度时，清开灵注射液在稀释至 1/64 和 1/128浓度时，NS1蛋白的表达量与病毒对照组相 比都明显降低( P<0. 05)，且存在剂量依赖性，由此可 见，利巴韦林和清开灵注射液明显抑制了 DENV-1 中NS1蛋白的表达。