关于进一步规范保健品原料管理的通知》〔卫法监发 (2002)51 号〕把人参(包括人参、人参叶、人参果)列 入可用保健品食品原料的名单后,人参根、茎、叶正式 作为保健品原料使用。目前,市场上人参类的保健品 已有上百种,包括人参酒、人参茶、人参口服液、人参胶 囊、人参含片等。2012 年,卫生部批准人参可以作为 新资源食品使用后,人参根、茎、叶在食品、保健品的 应用将有更广阔的前景。
1 材料与试剂
1.1 材料
在抚松县榆树乡参场,随机选取6 个样品采摘点, 每个点随机抽取 5 组 6 年生人参的根、茎、叶作为试验材料。共计 30 组人参根、茎、叶样品。
1.2 试剂
EDTA(意大利 VELP 公司)。
1.3 仪器
NDA701杜马斯定氮仪(意大利VELP公司);Milli-Q Advantage A10 型超纯水器(美国密理博公司); 上海一恒DZF-6053台式真空干燥箱;MS204S 型天平电子分析天平; S205DU电子天平(瑞士梅特勒托利多仪器有限公司)。
2 方法与结果
2.1 仪器工作条件
当燃烧反应器温度达 1 030 ℃以上、还原反应器 温度达 650 ℃以上、氦气(纯度≥99.99%)压力达 200 kPa 以上、氧气(纯度≥99.99%)压力达 250 kPa 以 上及氮气(纯度≥99.99%)压力达 300 kPa 以上时,自 动进样检测。
2.2 标准曲线线性关系和标准曲线方程
分别称取 EDTA 标品 0、12.2、21.7、30.1、41.2、 52.8、62.4、75.4、82.4、93.3、100.3、113.6、122.6 mg,用 锡箔纸包好,经制样器制样后检测,绘制标准曲线。以 总氮质量(mg)为横坐标、峰面积(mv×s)为纵坐标绘制 标准曲线。曲线方程: Y=4.373 955E 3+X×2.935 245E-4,R2=0.999 97。
2.3 样品制备
鲜参样品经洗刷沥水后置于 50 ℃烘箱内干燥,粉 碎后过 80 目筛,密封留存待用。以 EDTA 作为检测时 的标准物质。在测定前,所有样品以及 EDTA 标准物 质均在 70 ℃烘箱内再次干燥 72 h,置于干燥器内,待测。准确称取干粉样品,用锡箔纸包好,压缩空气。
2.4 仪器精密度
以标准品 EDTA 作为样品,在上述测定条件下连 续测定 11 次,RSD 值为 0.317%(n=11),结果表明,仪 器精密度良好。
2.5 重复性
随机选取一个样品的根、茎、叶,分别重复测定 6 次,统计分析结果,数据均符合 X∈X±2s,根蛋白质含 量的平均值为 15.851%,RSD 为 0.322%;茎蛋白质含 量的平均值为 8.561%,RSD为 0.341%;叶蛋白质含量 的平均值为 12.704%,RSD 为 0.326%。说明该试验方 法的重现性良好。
2.6 加样回收率
取已知含量的人参根、茎、叶粉末作为样品,各称 取 2 个样,分别加入EDTA0.8、2.4、4.6、7.2、9.0、10.4mg。 制样后按照“2.1”项下条件测定,统计结果,平均回收 率达 99.83%。
2.7 样品含量测定
30 组样品制备完成后,置于自动进样盘上。按照 “2.1”项下条件进行蛋白质含量测定,每个样品平行测 定 3 次。采用杜马斯定氮仪可自动计算出含氮量,运 用公式蛋白质含量=含氮量×6.25 计算出蛋白质含量, 蛋白质含量为 3 次平行测定的平均值。利用 Excel 及 SAS 9.2 统计系统中的单因素方差分析程序对蛋白 质含量进行方差分析和单因素比较。
2.7.1 样品点间蛋白质含量比较
6 个样品组间根、 茎中蛋白质含量无显著差异;叶中样品 1、4、5、6 间无 显著差异,但显著高于样品 2,样品 1、3、4、5 间无显著 差异,样品 2、3 间无显著差异(表 1)。
2.7.2 不同部位蛋白质含量比较
将每个样点间的人 参根、茎、叶蛋白质含量进行比较(图 1)发现,除样点 5 外,其余样点根、茎、叶蛋白质含量均存在显著差异, 表现为根>叶>茎;样点 5 根、叶中蛋白质含量显著高 于茎,根与叶的蛋白质含量无显著差异;根部蛋白质含量为 14%~15%,茎部蛋白质含量为6%~8%,叶部蛋白 质含量为10%~14%,根部蛋白质含量显著高于叶部蛋 白质含量,叶部蛋白质含量显著高于茎部蛋白质含量; 根部与茎部蛋白质含量在不同样点间较稳定,叶部蛋 白质含量在不同样点间变化较大。
3 讨论
试验结果表明,6 个采样点间人参根和茎的蛋白 含量无显著差异,而 6 个采样点间叶部蛋白质含量差 异显著,可能是由于叶片为采样时期的主要生长组织, 各植株生长状态有所不同,也可能是光照等环境因素 造成的;而任一组内蛋白质含量个体之间无显著差异; 但同一人参样品的根、茎、叶间存在显著差异。
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