上海一恒科学仪器有限公司发现目前，国内对酵母保护的研究主要集中在冷冻干燥中的应用及干燥工艺优化，这两个过程会造成部分微生物细胞的死亡、损伤及某些酶蛋白分子的钝化。很少有研究将菌种优化与保护剂筛选相结合应用以确保烘干后的酵母数量和活性。本研究上海一恒科学仪器有限公司采用Box-Behnken设计法和响应曲面分析法，对产朊假丝酵母培养工艺参数和干燥保护剂进行筛选优化，以期获得最佳培养参数和保护剂组合方案，以实现酵母相关产品更廉价和方便地应用。
仪器与设备
SW-CJ-2FD 超净工作台(浙江苏净净化设备有限 公司)；LDZX-50KBS 立式压力蒸汽灭菌锅(上海申安医疗器械厂)；DHG-9240A台式恒温鼓风干燥箱 (上海一恒科学仪器有限公司)；JA6102 超准微量电子天平(上海海康电子仪器厂)；SKY-2012 大容量 摇床(上海泸粤明科学仪器有限公司)；MJ-160BS-2 霉菌培养箱(上海新苗医疗器械制造有限公司)。
上海一恒DHG-9240A台式恒温鼓风干燥箱
结果表明，产朊假丝酵母最佳培养条件为装液量45mL/250mL，转速200r/min，温度30℃，培养时间24h。在此条件下，培养的产朊假丝酵母数量可以达到9.34×108CFU/mL；最佳保护剂组合1%L-谷氨酸钠、12%脱脂奶粉、6%乳糖，经干燥后，产朊假丝酵母复苏率达到81.9%。此时活菌数7.65×108CFU/g，比未加保护剂组提高了3.83倍。
产朊假丝酵母因其营养特性以及在动物饲料和人类食品上的功能性，引起越来越多的重视和应用研究。上海一恒科学仪器有限公司发现本研究的前期工作优化了培养基成分，通过装液量、转速、温度、培养时间等发酵参数的优化进一步提高酵母培养数量。采用单因素试验与响应面分析法相结合的试验方法。试验结果表明在一定的范围内，装液量与酵母菌数多少呈反比关系，这与研究结果相一 致。摇床转速反应的是通气量指标，转速过低，氧气供应不足，会造成葡萄糖积累，高浓度的葡萄糖生成会导致Crabtee阻遏效应，抑制呼吸酶的活性，增加酒精含量，从而影响酵母菌的繁殖。 增大转速能促进氧气溶解，提高生物量和菌数。但是转速过高会增加机械剪切力，酵母细胞芽痕对机械剪切力很敏感，因此转速不宜过高。本研究得到最佳转速为200r/min，与实验结果相 一致。产朊假丝酵母虽然有较宽的温度适应性，但培养温度过低，将影响细胞内酶的活性，不利于酵母的快速生长。
温度过高，酵母菌对葡萄糖的抑制作用会受到很大的限制，适合酵母的生存温度为28℃~32℃。确定最佳温度为30℃，在此温度下，酵母能获得较好的生长。从培养时间看，酵母菌数在对数生长末期进入稳定期时数量达到最大。上海一恒发现在本研究中，酵母最佳培养时间是24h，酵母处于稳定期，能获得较多数目的细胞。 为了方便酵母的使用和储存需对液体培养的酵母进行浓缩和干燥，干燥会造成酵母数量的大量降低，因此干燥保护剂是酵母干燥的必须环节。保护剂在制备酵母活性干细胞过程中能起到保护作用，有效地提高活菌率。保护剂的种类很多，研究中，在培养基中添加甘油，引起酵母生存环境的水分活度降低。
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