材料与方法
MLS-3750 型 灭 菌 锅、STAC-S45F 型 恒 温 培 养箱, 日本三洋公司;KDC-1044 型低速离心机, 安徽中佳科仪有限公司; 高速离心机, 德国 Eppendorf 公司;恒温培养箱(DHP-9272 型),上海一恒公司;超低温冰箱,中国海尔集团公司;pH 计, 瑞 士 Mettler Toledo 公 司 ; 莱 卡 荧 光 显 微 镜 DM4000B, 上海徕卡显微系统贸易有限公司 ; ZHJH-1214B 超净工作台, 南京依贝仪器设备有 限公司;高压蒸汽灭菌锅,日本三洋 MLS-3750;真 空冷冻干燥机,Labconco FreeZone;全自动干热灭 菌器(ADVANTEC SP-650 型),广州绿百草科学仪器有限公司。将植物乳杆菌 LIP-1 接 种于脱脂乳培养基中,37 ℃培养活化。待凝乳后再 以 2%的体积分数接种于优化培养基中,37 ℃静 置培养 18 h。 然后在植物乳杆菌 LIP-1 经 37 ℃活 化培养 2 代。
结果与分析
当初始培养 pH 值分别为 6.8 与 7.4 时,发酵 活菌数较高,分别为 9.79,9.70 lg(CFU/mL),且无 显著性差异变化(P>0.05),但冻干存活率分别为 81.76%,72.43%,具有显著性差异(P<0.05)。 为了 减少影响因素,本研究选择发酵菌数相似,但冻干 存活率存在显著差异的 2 组进行后续试验, 即以 初始 pH 值为 6.8 培养的 LIP-1 作为试验组,以初 始 pH 值为 7.4 的 LIP-1 作为对照组,来进一步探 究不同初始 pH 值对乳杆菌抗冷冻干燥活性的内 在影响机制。试验组 pH 值降低得更快, 活菌数增长更多,最后均趋于稳定。 研究发现初始 pH 值对菌株生长的影响与酶的活性密切相关, 适宜的初始 pH 值,可以使酶活性增加,促进菌株 的生长。我们认为 pH 6.8 作为最适初始 pH 值,可 以使植物乳杆菌相关的酶活性增加,促进其生长。 与本研究相似,詹兰兰等研究发现,初始 pH 值 能显著影响乳酸菌菌株 E2 和 D2 的生长。