1 材料与方法
精密分析天平(SBA224S,Sartorius公司);电 子天平(SBA2202S-CW,上海山岳科学仪器有限公 司);薄层色谱扫描仪(KH-2000,上海添时科学仪 器有限公司);可见分光光度计(722S,上海金枭科学仪器有限公司);磁力搅拌器(EMS-8C,上海旌 派仪器有限公司);IKA旋转蒸发仪(RV 10,艾卡 仪器设备有限公司);电热恒温鼓风干燥箱(DHG9053,上海一恒科学仪器有限公司)。精确称取2份5.00 g阿魏酸于圆底烧瓶,加23.94 g 甘油,1份溶于10 mL二甲基亚砜中,另1份无溶剂, 分别取反应物总质量的10%固定化酶加入上述圆底 烧瓶搅拌均匀,置于旋转蒸发仪中,转速采用70 r/ min,在60 ℃下反应10 h。反应完毕后,用100 mL甲 醇分两次萃取,置于锥形瓶中封口,取0.5 μL样品, 采用薄层色谱检测进行定量分析。
2 结果与分析
在合成阿魏酸甘油酯的研究中,考虑通过反应体 系的构建和反应器的选择实现副产物乙醇的及时去 除,并筛选出对脂肪酶活性抑制较小且底物混溶程度 较好的有机溶剂。无论是有机溶剂体系还是无溶剂体 系,在旋转蒸发仪中的酶催化活性较好,这主要由于 旋转蒸发仪可以去除副产物乙醇,避免其对酶活性的 抑制作用和促进反应向正反应方向进行。由于阿魏酸 和甘油在有机溶剂中的溶解度较差,因此,在旋转蒸 发仪中无溶剂体系下固定化脂肪酶Novozyme 435催化 阿魏酸的转化率最高,为85.30%。DPPH是一种比较稳定的自由基,而且它的使用 最为广泛,常用来评价物质的抗氧化能力。试验 中,采用不同浓度阿魏酸样液及阿魏酸甘油酯来测 定对DPPH自由基清除能力,根据抑制率来判断其抗 氧化能力。
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