恒温培养箱使用于豆科灌木翅荚决明德的分析

翅荚决明（Cassia alata Linn.）是豆科决明属多年生直立灌木，原产于热带美洲，今在我国云南、广西、台 湾等南部地区已有大面积栽培 。翅荚决明是一种具有 观赏性和较高药用价值（如抗菌、抗炎、缓泻、 驱虫、抗氧化等药理活性）的植物。翅荚决明生长 速度迅速、分枝力强、生物产量高、叶量丰富、草质柔 软，是南方人工草地建植、石漠化地区生态修复的优势 豆科牧草品种之一 。目前，尚未见有翅荚决明饲喂动 物食用安全性试验的相关研究报道。为考察翅荚决明饲 用对动物生长发育的影响，开展了翅荚决明饲喂昆明小 鼠的安全性试验，以期为翅荚决明植物资源作为动物食 用性的开发利用提供依据。

健康清洁级昆明种小白鼠，雌、雄各半，7~8 周龄， 体重 16~20 g，购于广西医科大学实验动物中心，动物合 格证号 ：XCXK 桂 2009-2002。清洁级环境饲养，在人 工照明 12 h、室温 16~24 ℃、相对湿度 57%~62%、通风 良好情况下饲养，观察 7 d 后进行试验。

翅荚决明嫩枝叶采摘于广西壮族自治区畜牧研究所 牧草综合试验基地。将翅荚决明叶洗净，烘干至恒重， 通过粉碎机粉碎后过 80 目筛，阴暗干燥处保存。精密称 取翅荚决明叶粉末，使用 0.3% 羧甲基纤维素钠溶液为溶 剂制备翅荚决明悬浮液，翅荚决明悬浮液依靠实际需要 的浓度配置，现配现用。

希森美康全自动血球分析仪（日本希森美康株式会 社），全自动生化分析仪（日本日立公司），电子分析天 平（梅特勒托利多国际贸易有限公司），恒温培养箱（上海一恒科技仪器有限公司），台式高容量离心机（德国 Eppendor 公司），尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总蛋白 （TP）和总胆固醇（CHO）等血液生化指标试剂盒（南 京建成生物工程公司产品）。

将昆明小鼠 50 只（雌、雄各半），随机分为 4 个 剂量组和 1 个空白组，每组 20 只，4 个剂量组分别以 6 000、3 000、1 500 mg/kg·BW 和 750 mg/kg·BW 的 剂量在 24 h 内灌胃 1 次翅荚决明悬浮液，空白组小鼠灌 胃等体积的溶剂（0.3% 羧甲基纤维素钠溶液）。所有小 鼠灌胃前后 6 h 禁食不禁水，并在灌胃后每天记录小鼠 的饮食、饮水量变化、中毒时间、症状及死亡数量，计 算半数致死量（LD50）。预试验第８ d，将所有小鼠断颈 处死，剖检并观察心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸 腺、胃﹑肠道等脏器的病变情况。若未能测出半数致死 量（LD50），则进行最大耐受试验。

因急性毒性预试验中小鼠在灌胃的最大给药体积 6 000 mg/kg·BW 条件下未测出 LD50，故采用 24 h 内单 次给药的方法测定药物的最大给药量，以评价翅荚决明 的亚慢性毒性。具体方法如下 ：将 40 只禁食 12 h 的小 鼠（雌、雄各半）均分为 2 组，分别为药物组和空白组， 药物组剂量为 6 000 mg/kg·BW 翅荚决明悬浮液，空白 组小鼠灌胃等体积 0.3% 羧甲基纤维素钠溶液。灌胃药 物后持续观察 30 min，并在给药结束后 2 h 再观察 1 次， 之后每天观察 1 次，仔细记录动物的中毒表现和特点， 毒性反应出现和消失的时间、死亡时间。连续观察 7 d， 记录观察期内小鼠自由采食和饮水的情况。观察期结束后将所有存活小鼠处死，进行眼观病理学检查。

在观察灌胃后至第 7 d 的试验过程中，小鼠外观灵 活自如，精神状态良好，食欲逐步增加，排泄物无异味 异样，呼吸平稳，无不良反应和死亡现象。因未能测出LD50，故进行最大耐受试验。小 鼠 在 单 日 给 药 量 为 6 000 mg/kg·BW 时， 无 任 何毒性反应，观察期结束后处死所有小鼠，通过解剖 未发现明显可见的病理变化。结果表明，最大给药量为 6 000 mg/kg·BW 时，翅荚决明实际无毒。试验结果表明，各组小鼠试验期间各组均无死亡，临床表现正常 ；各试验组体重与空白组比较 ：高剂量组 给药后 10 d 至试验结束对雄性和雌性小鼠体重增长均有 显著作用（P<0.05 或 P<0.01），中剂量和低剂量组给药 后 30 d 至试验结束对雄性小鼠体重增长均有显著作用 （P<0.05 或 P<0.01），中剂量组给药后 10 d 至试验结束 对雌性小鼠体重增长均有显著作用（P<0.05 或 P<0.01）， 低剂量组给药后 40 d 至试验结束对雌性小鼠体重增长均 有显著作用（P<0.05 或 P<0.01）。

因本次研究使用的试验材料是翅荚决明的叶子粉 末，不溶于水，故使用羧甲基纤维素钠为溶液为溶剂， 制备翅荚决明悬浮液进行试验考察。在急性毒性试验 中，小鼠未出现死亡及毒性反应，故未能测出半数致死 量（LD50）。在最大耐受试验中，对小鼠 24 h 内单次灌胃 最大给药量 6 000 mg/kg·BW 时仍未出现任何毒性反应， 7 d 观察期结束后处死存活小鼠，通过解剖未发现明显可 见的病理变化，结果表明翅荚决明无急性毒性作用。

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