一恒水浴锅在抗氧化活性初步研究的使用

青刺果 Prinsepia utilis Ｒoyle 又名青那果，含油 量高，是一种主要分布于中国云南丽江地区的蔷薇 科扁核木属植物，生于海拔 1 800 ～ 3 200 m 的 山坡、山谷或路旁等处。目前青刺果黄酮提取物 在药理方面有相关报道，主要集中在青刺果总黄酮 提取物的降血糖、降血脂的作用，对动物内脏的 保护作用以及免疫调节作用等。

FA2004 电子天平( 上海海康电子仪器厂) ; KQ5200DB超声波清洗机 ( 昆山市超声仪器有限公司) ; RE-2000A型旋转蒸发仪 ( 上海亚荣生化仪器厂) ; HWS24 电热恒温水浴锅( 上海一恒科学仪器有限公司) ; Cary 60 UV-vis 紫外可见分光光度计( 美国安捷伦科技有限公司) ; QE-200 万能粉碎机( 浙江屹立 工贸有限公司) ; TC-15 套式恒温箱( 海宁市新华医 疗器械厂) ; 84-1A 磁力搅拌器( 上海司乐仪器有限 公司) 。

青刺果仁( 购于云南丽江，经昆明植物研究所 刘海洋研究员鉴定为青刺果 Prinsepia utilis Ｒoyle 的 果仁) ; 芦丁对照品( 上海源叶生物科技有限公司， 批号: Y01D8S49613，含量≥98% ) ; DPPH ( 1，1-diphenyl-2-picryhydrazyl，上海阿拉丁生化科技股份有 限公司批号: E1702052，含量≥97% ) ; ABTS 试剂盒 ( 南京建成生物工程研究所，批号: A015-2) ; 维生素 C 原料药( 武汉远成共创科技有限公司，规格: 25 kg /桶，批号: 200-066-2) ; Trolox 制剂( 水溶性维生素 E 溶液，规格: 10mmol·L － 1 ，南京建成生物工程研究 所，批号: A015-2-1) ; D101 大孔树脂( 沧州宝恩吸附 材料公司，批号: 20170323) ; 乙醇( 江苏强盛功能化 学股份有限公司，批号: 20170602) ; 正己烷( 上海阿 拉丁生化科技股份有限公司，批号: K1728091) 。

取干燥青刺果仁少许经粉碎机粉碎后，称取适 量，按一定比例与正己烷在三角瓶中混匀，加入磁 子，封口，将三角瓶放于磁力搅拌器上搅拌一定时 间，随后用一次性滴管吸出三角瓶中的正己烷油脂 混合物; 用上述方法搅拌数次，合并所得正己烷油脂 混合物，经减压浓缩去除正己烷，干燥后即得青刺果 仁油脂。按下式计算得油率。 得油率( % ) = 青刺果仁中油脂质量/青刺果 仁的质量 × 100 % 。 采用 Orthogonality Experiment Assistant 2． 3 软件 对试验数据进行分析处理。

将脱脂后的青刺果仁粉末，准确称量 200 g，以 料液比 1 ∶ 8 的比例将青刺果仁材料加入 70 % 的乙 醇水溶液，在 75℃ 条件下回流提取 2 次，合并两次 的提取液并进行过滤富集，经减压浓缩、水浴蒸干， 得总黄酮粗提物。

在浸 出次数为 2 次，浸出时间为 60 min 时，分别考察料 液比 1 ∶ 2、1 ∶ 3、1 ∶ 5、1 ∶ 8、1 ∶ 12、1 ∶ 16 对青刺果仁 脱脂效果的影响。在料液比不断加大 的情况下，得油率随即上升，在 1 ∶ 5 后开始有所下 降，可能是由于料液比过大后，易导致挥发性油脂挥 发所致。基于此，选取料液比为 1 ∶ 5。

该试验先采取了乙醇直接提取的方式对青刺 果仁进行提取分离，结果发现油状极为明显，虽然在 此条件下总黄酮含量为 40% ，但是过柱分离时间超 过 36 h，极大的影响分离纯化效率，因此脱脂是非常 有必要的。通过脱脂单因素考察，建立 3 因素 3 水平的正 交试验方案，优选得到最佳脱脂工艺为浸出次数 5 次，料液比 1 ∶ 2，浸出时间 100 min，在此工艺条件下 测得，青刺果仁总黄酮含量超 50% ，过柱分离效率 也大有提升。其次，青刺果仁总黄酮表现出很强的 DPPH·、ABTS + · 清 除 能 力，其 IC50 值 分 别 为 0． 014 0，0． 163 0 mg·ml － 1 ，未来在抗氧化药物、化 妆品等领域内具有一定的开发和研究价值。



 

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