液质联用技术的天然配体筛选升级！！！

    超滤亲和-液质联用技术是通过受体与有潜在 活性的小分子配体结合形成配体-受体配合物，与未 结合的化合物通过超滤膜分离出来，然后配合物中 释放出结合的配体化合物，最后通过超高效液相色 谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）进行分析鉴定。超滤亲和-液质联用技术是一种从天 然产物中筛选生物活性化合物的高效方法 。DHP 恒温培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）； YXQ 高压蒸汽灭菌锅（上海博讯实业有限公司）； DL-CJ-2N 超级工作台（北京东联哈尔有限公司）； Milli-Q Reference超纯水仪（美国Millipore公司）。

    精密称取黄芪甲苷、毛 蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、白术 内酯Ⅰ对照品适量，分别置于 10 mL 量瓶中，用甲醇 溶解并定容至刻度，配制成质量浓度分别为 1.02、 0.97、0.99、1.05、1.09 mg·mL−1 的对照品溶液，4 ℃避 光保存。使用前，50% 甲醇溶液稀释到所需的质量 浓度。超滤亲和筛选只能确 定化合物与靶标蛋白有结合性，但是生物活性还需 进一步实验验证。后期本课题组会深入研究白术 内酯Ⅰ在细胞水平及动物体内对 Tim-3 表达的影响 及作用机制。