1材料与方法
1.1 材料与试剂
壳聚糖(脱乙酰度80%),北京中生瑞 泰科技有限公司生产;壳聚糖酶(酶活力40000U/g),诺维 信生物科技有限公司生产;三氯乙酸(分析纯),上海展云化工有限公司生产;D-氨基葡萄糖,SIGMA公司生产;氢 氧化钠、无水亚硫酸钠、乙酸钠、乙酸、3,5-二硝基水杨 酸、苯酚、铁氰化钾、磷酸二氢钾等,国药集团化学试剂有 限公司生产。
1.2 仪器
DL-5低速大容量离心机,上海安亭科学仪器厂生产;旋转蒸发器RE-52A,上海亚荣生化仪器厂生产; 紫外-可见分光光度计,上海菁华科技仪器有限公司生 产;DK-S22型电热恒温水浴锅,上海精宏实验设备有限公司生产;电热鼓风干燥箱,上海一恒科学仪器有限公司生产;电子天平,上海海康电子仪器厂生产。
2 结果与分析
在酶浓度为 1600U/g,反应时间2h,pH5.4的酶解条件下,得到壳聚糖 酶在不同温度下水解壳聚糖的效果。还原糖浓度随温度的上升而呈现出先增加 后减少的趋势。其中,在30~35℃,还原糖浓度随温度的 上升而缓慢增加;在35~40℃,还原糖浓度随温度的上升 而急剧增加,且在40℃还原糖浓度达到最高;当温度高于 40℃,还原糖浓度开始下降,且随着温度的持续增加,还 原糖浓度越来越低。
3 结论
根据单因素试验结果,将温度、 pH、壳寡糖酶添加量、反应时间作为考察因素,进行正交 试验。由正交试验结果分析可以得出,酶添加量和pH均 对酶解壳聚糖制备壳寡糖产生了较大的影响,其中pH的 影响最为显著;影响酶解效果的因素主次依次为:pH>酶 添加量>反应时间>温度;利用壳聚糖酶降解壳聚糖制 备壳寡糖的最优工艺组合为A1B1C2D2,即温度35℃、 pH5.0、酶添加量2000U/g、反应时间4h。
免责声明:文章仅供学习和交流,如涉及作品版权问题需要我方删除,请联系我们,我们会在第一时间进行处理。