谈饮用水微生物检测的影响因素
来源：未知
发布日期：2019-04-16 13:55【大 中 小】
1 谈饮用水微生物检测的影响因素影响因素
1.1 人员
微生物检测人员应具有专业的知识和技术能力，并通过培训确保人员检测能力的持续。
1.2 环境
（1）实验室应配置专门用于微生物检验的无菌操作间及检测设施。实验前对无菌操作间进行环境的清理、消毒（如紫外线消毒，作用时间30min,人员需在关闭紫外灯30min后入内作业）。
（2）环境无菌评价。对已经消毒的环境进行空白实验：无菌操作台在开启二十分钟后，四个角落距边缘5公分的地方及无菌操作台中心位置放置五个空白培养皿开盖暴露，严格控制30min后倾注已灭菌冷却至36℃左右的营养琼脂，同时对无菌操作间内无菌操作台外的环境也按照一定间距进行空白实验。在36℃±1℃下恒温培养48小时，确认平板上的菌落数，如不符合无菌要求，应分析原因并采取适当措施。
1.3 设备
恒温培养箱，高压灭菌锅或干热灭菌器的温度应定期进行校准，合格后方可使用，并对其温度达到平衡的时间以及其运行温度进行记录。如使用高压灭菌锅，高压灭菌锅的压力也应跟温度同时校准并记录。
1.4 药品配置
培养基通常采用高压湿热灭菌个法103kPa，121℃条件下灭菌20min，并按要求调节培养基pH，培养基如有特殊要求也应满足。
1.5 器具
（1）湿热灭菌
采用高压蒸汽灭菌时，需在103kpa，121℃条件下灭菌20min。在高压灭菌时应注意灭菌物品不能挤压过紧，以免影响蒸汽的流通，使所有物品都能达到彻底灭菌的效果。
（2）干热灭菌
采用干燥箱灭菌，180℃灭菌1h或160℃灭菌2h。干热灭菌时时间控制应在干燥箱温度达到设定温度并平衡时开始计时。
2 实验过程
以饮用水中菌落总数的检测为例
2.1 设备:高压灭菌锅、恒温培养箱
2.2 主要试剂:营养琼脂
2.3 实验用器具
刻度吸管、酒精灯、试管、90mm平皿、试管架等（均经高压灭菌或紫外消毒）
2.4 检测方法
生活饮用水国家标准方法GB/T5750.12–2006中1.1平皿计数法
2.5 样品的制备及检验
2.5.1样品的制备
将样品标准管从冰箱取出，置于无菌室室温平衡15min。将100mL无菌缓冲液倒入100mL无菌取样瓶中定量，打开盲样管，将有颜色的盲样胶盘在确认无破损之后，无菌转移至100mL 无菌缓冲液中，充分震荡至胶盘完全溶解后静置，计时十分钟。得到待检测盲样品。
2.5.2样品的检验
检验人员进入无菌准备间，穿戴上已紫外消毒的无菌实验服、一次性鞋套、灭菌手套（必要时使用75%酒精进行消毒）、口罩后进入操作间，准备检测。
2.5.2.1原样检测：在已点燃的酒精灯旁，吸取1.00mL待测样品于培养皿中，待营养琼脂冷却至约36℃时，倾注平皿，盖上平皿后，轻轻晃动平皿，使水样与营养琼脂充分混匀。同时做平行样的测定，做好标记。36℃±1℃恒温培养48h后结果如图。
2.5.2.2稀释：选择合适的稀释倍数，使用0.9%灭菌生理盐水进行样品的稀释，使培养皿上生长的菌落数在合理计数范围。
2.5.2.3同时对环境及琼脂进行空白实验。
2.5.2.4操作中应注意的事项
（1）实际水样检测时，用于微生物检测的水样在采集时应进行余氯去除，消除余氯对微生物的持续抑制作用。
（2）操作人员必须有牢固的无菌观念，整个过程均为无菌操作，尽量靠近火焰，动作迅速，手法规范。
（3）从样品的制备到检测都应防止二次污染。如实验用器具的传递。
（4）及时填写原始记录，原始记录应如实填写，并尽可能准确完整反映检测过程。
3 讨论
微生物检测数据的准确性要得以保证，需要检测人员严谨的工作态度如实报告，注意以上几个要素的要求，为安全用水提供依据
