一恒生化培养箱的动物的耐药性研究应用

材料

全自 动 微 生 物 鉴 定/药 敏 系 统 ( BD PhoenixTM - 100) 、比浊仪( Phoenix SpecTM ) 为美国 BD 公司生产。 生物安全柜( 1300A2) 为美国 Thermo 公司生产，PCＲ 扩增仪( ETC-811) 为北京东胜创新生物科技有限公司 生产，生化培养箱( LＲH-70) 为上海一恒科学仪器有 限公司生产。称取每份粪便样品 5 g，加入 2 mL 无菌生理盐 水，室温振荡 10 min，静止 2 min，上清为菌悬液。 吸取 20 μL 粪便生理盐水菌悬液于麦康凯琼脂平板， 半板涂布半板划线，( 36 ± 1) ℃ 培养 16—18 h，观察 菌落形态，挑取疑似单菌落于麦康凯琼脂平板二次分 离纯化。

方法

挑取大肠埃希菌的单菌落接种于 2 mL MH 肉汤培 养液中，( 36 ± 1) ℃培养 16—18 h，将增菌液稀释至 0. 5 麦氏比浊度备用。蘸取 0. 5 麦氏比浊度的菌液在 MH 平板上均匀涂布。将四环素 E-test 试纸条放置于 MH 平板中央，( 36 ± 1) ℃ 培养 16—18 h，参考 CLSI 标准( 2018 版) 判定最小抑菌浓度 MIC( minimal inhibitory concentration) 。从 234 份陆生野生动物粪便样品中，分离获得 40 株疑似大肠埃希菌，经分子生物学鉴定和 BD PhoenixTM-100 全自动微生物鉴定，确定分离株均为大肠埃 希菌，分离率为 17. 1% ( 40 /234) 。大肠埃希菌是常见条件性致病菌之一，也是细菌 群落在肠道微环境中获得和传递毒力及耐药相关遗传 元件的重要菌属，大肠埃希菌的耐药谱也是肠道菌群 耐药基因水平传播评估的重要指标。

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