电热恒温培养箱的奶酶解工艺的改进应用

材料与方法

精密 pH 计 ( 酸度计) ，意大利哈纳; JM 85A 型 胶体磨，山东省莱州市顺通胶体磨厂; DM－2100AⅢ 自分渣 磨 浆 机，河 北 沧 州 铁 狮 磨 浆 机 械 有 限 公 司;HH—6 电热 恒 温 水 浴 锅，河南智诚科技发展公司; YB881—4 电热恒温鼓风干燥箱，苏州豪顺自动化设 备有限公司; DPH－9012 /9032 型电热恒温培养箱，上 海一恒; BYC—A 电子计重天平，深圳市博佳电子仪 器有限公司; 79－1 磁力加热搅拌器，金坛市富华仪 器有限公司。采用正交实验方法，以水解度为测定指标，考察 复合酶比例 ( A) 、反应 pH 值 ( B) 、反应温度 ( C) 和反应时间 ( D) 4 个因素对水解度的影响。以水解度为测定指标，考察其各自的蛋 白酶用量、反应温度、反应时间和反应 pH 值 4 个因 素对水解度的影响，确定可控因素的最佳范围。

结果与讨论

随反应温度的增加，在 55℃ 时 DH 最高。温度对酶促反应的影响有 2 个方面，温度 提高可使反应速度加快，随着温度的提高，酶失活速 度也开始加快。因此，适宜反应温度为 55℃。随着反应时间的逐渐增 加， DH 呈上升趋势，在反应 4h 时 DH 最高。随着时间的 延长，水解度的上升趋势应该趋于平缓，而图中显示 有下降趋势，主要原因可能是水解液水解时间过长， 多肽分子进一步分解，影响了水解度的测定。综 合考虑，适宜反应时间为 4h。量取 100mL 的大豆蛋白液 5 份，调 pH 分 别 为 6. 0、6. 5、7. 0、7. 5、8. 0，均加入 9000U·g －1 木瓜蛋 白酶，在 55℃ 下分别反应 3h 后，终止酶解反应，测 定水解度。随 pH 的增加，DH 呈上 升趋势，在 pH 至 6. 5 时 DH 开始下降。由于 pH 过 高、过低都会影响酶促反应，水解度最大时即为最佳 pH。因此，最适 pH 为 6. 5。

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