养血补元合剂质量标准分析(一恒DHG-9140使用)

养血补元合剂由黄芪、白芍、当归、川芎、麸炒 白术等多味中药材组成，具有气血双补，助阳固卫的 功效，用于久病失治、病后气血两亏或失血过多，以 致气血两虚，临床上多用于术后失血引起的贫血，症 见面色苍白或萎黄，头晕目眩，四肢倦怠，气短懒言， 心悸怔仲，饮食减少，舌淡苔薄白，脉细弱或虚大无力。 方中白芍，味苦、酸，性微寒，归肝、脾经。具有养 血调经、敛阴止汗、平抑肝阳的功效。

1 仪器与试药

ZF-20D 型暗箱式紫外分析仪，DYQC 型医用超声波提取器，SHIMADZU AUW120D 电子天平，DHG9140型电热恒温鼓风干燥箱（上海一恒科技有限公司）， 硅胶 G 板（青岛海洋化工厂分厂）。丹参对照药材 （批号 120923-201615）、丹参酮Ⅱ A（批号 110766- 201520）、白术对照药材（批号 120925-201611）、半 夏对照药材（批号 121272-201605）、芍药苷（批号 110736-201640）购于中国药品生物制品检定所。养血 补元合剂样品（批号 170326、170327、170328 ）由陕 西中医药大学第二附属医院制剂室生产提供；甲醇、 磷酸、乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 薄层色谱鉴别

2.1 黄芪的薄层色谱鉴别养血补元合剂

30 mL， 蒸干，残渣加甲醇 30 mL，加热回流 1 h，滤过，滤液 缓慢加于中性氧化铝柱（100 ～ 120 目，5 g，内径为 10 ～ 15 mm）上，用 200 mL 的 40 % 甲醇洗脱，收集 洗脱液，置水浴锅上蒸干，精密量取 30 mL 水使残渣 溶解，用水饱和正丁醇溶液 20 mL，振摇提取 2 次， 收集正丁醇液，用水洗涤 2 次，每次量取 20 mL 水， 收集正丁醇液，水浴蒸干，精密移取甲醇 1 mL，使 残渣溶解，即为供试品溶液。称取黄芪对照药材粉末 3 g，加甲醇 20 mL，黄芪对照药材溶液的制备方法同 上。照薄层色谱法（《中国药典》2015 年版四部通则 0502）试验，吸取养血补元合剂供试品溶液、黄芪对 照药材溶液各 5 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以石油醚（60 ～ 90℃）- 三氯甲烷 - 乙酸乙酯（2:1:1） 溶液为展开剂，展开，取出，晾干，5% 香草醛硫酸溶 液为显色剂，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱 中，可见橙色的斑点与对照药材相对应，且位置相同。 见图 1。

2.2 麸炒白术的薄层色谱鉴别

取养血补元合剂 30 mL，水浴蒸干，加正己烷 25 mL，置超声仪中， 25 min 后取出，滤过，滤液即为养血补元合剂供试品 溶液。称取白术对照药材 0.5 g，加正己烷 2 mL， 白术对照药材溶液制备方法同上。照薄层色谱法 （《中国药典》2015 年版四部通则 0502）试验，吸 取养血补元合剂供试品溶液、白术对照药材溶液各 10 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以石油醚 （60 ～ 90℃）- 乙酸乙酯（50:1）为展开剂，展开， 取出，晾干，5% 香草醛硫酸溶液为显色剂，加热使斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点，并应显有一桃 红色主斑点（苍术酮）。

2.3 当归、川芎的薄层色谱鉴别

取养血补元合剂 溶液 30 mL，水浴蒸干，量取并加入乙醚 20 mL，置于 超声仪，超声 10 min，收集滤液蒸干，精密移取乙醇 1 mL 使残渣溶解，作为养血补元合剂供试品溶液。称 取当归、川芎对照药材各 0.5 g，当归、川芎对照药材 溶液的制备方法同上。照薄层色谱法（《中国药典》 2015 年版四部通则 0502）试验，吸取养血补元合剂供 试品溶液、当归、川芎对照药材溶液各 10 μL，分别点 于同一硅胶 G 薄层板上，以正己烷 - 乙酸乙酯（4:1） 为展开剂，展开，取出，晾干，紫外光灯（365 nm） 下检视。供试品色谱中，可见相同颜色的荧光斑点与 对照药材相对应，且位置相同。见图 2。


3 芍药苷的 HPLC 法测定

色谱柱为：Angilent C18（5 μm， 250 mm×4.6 mm）；流速：1.0 mL/min；流动相：乙 腈 -0.1% 磷酸溶液（14:86），柱温：30℃，检测波长 为 230 nm，理论板数按芍药苷峰计应不低于 3 000。取同一批号（批号160315）样品6份， 分别制备供试品溶液，每次进样 10 μL 测定，结果芍药 苷平均含量为122.60 μg/mL，RSD为1.99%，结果见表4。 3.10 加样回收率试验 精密称取同一批养血补元合 剂（批号 160315）9 份，已知芍药苷 122.60 μg/mL，分 别精密加入一定量的芍药苷对照品溶液，进行测定， 并计算回收率，结果平均回收率为 98.22%，RSD 为 1.00%。取养血补元合剂供试品（批号 160315），按上述供试品制备方法制备供试品溶液， 精密吸取 10 μL，连续进样 5 次，按上述条件测定峰面置具塞锥形瓶中，精密量取并加入稀乙醇20 mL，密塞， 称定重量并记录，超声处理40 min，放冷，再称定重量， 用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4 讨论

制备方法的确定：精密量取三 份养血补元合剂各 5 mL，分别置于两个 25 mL 容量 瓶及圆底烧瓶中，加稀乙醇至刻度，圆底烧瓶中加入等量的稀乙醇，精密称定并记录重量，两个容量瓶放 入超声仪中，超声 30 min、40 min，圆底烧瓶加热回 流 30 min，提取完毕后，取出、放凉，精密称量，用 稀乙醇补足损失的重量，充分摇匀、过滤、取续滤液， 即为供试品溶液。检测三种供试品溶液中芍药苷的含 量，结果显示，超声 30 min 制备的养血补元合剂供试 品溶液中芍药苷的含量与超声 45 min 制备的供试品中 芍药苷的含量几乎相同，而且高于圆底烧瓶加热回流 30 min 制备的供试品中芍药苷的含量。结果提示：养 血补元合剂超声 30 min，芍药苷已经完全提取，其含 量并不随超声时间的延长而增加；圆底烧瓶加热回流 30 min 制备的供试品溶液中芍药苷含量较低，说明加 热回流法不能完全提取供试品中的芍药苷，该方法提 取效率低，若采用该方法制备供试品溶液，将会影响 芍药苷含量的测定。预实验结果显示，超声提取可简 化提取过程，提高提取效率。故选定超声 30 min 作 为制备养血补元合剂供试品溶液的制备方法。



 

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