一恒分析单胚胎移植妊娠结局的影响

随着辅助生殖技术的飞速发展，多胎妊娠率也 逐年增高，从而导致母婴并发症也越来越多。单 胚胎移植作为降低多胎妊娠的有效手段之一，得到 人们越来越多的重视。相对于双胚胎移植而言，要 保证较好的妊娠结局，单胚胎移植对移植胚胎的质 量要求更高。目前移植胚胎的选择依据仍然主要是 形态学观察指标，卵裂球数目能够有效的反映胚胎 的发育速度，可以预测胚胎活力与妊娠结局。根据 Ｉｓｔａｎｂｕｌ共识，Ｄａｙ２ 卵裂 球 数 目 为 ４ 细 胞，Ｄａｙ３ 卵裂球 数 目 为 ８ 细胞的胚胎具有较高的着床能力。同时 Ｍａｇｌｉ等研究指出，Ｄａｙ３的８细胞阶 段的胚胎是理想的移植胚胎。然而，临床上有较多 患者 会 获 得 发 育 较 快 的 Ｄａｙ３ 受 精 胚 胎 （＞８ 细 胞），这类胚胎移植的妊娠结局状况鲜有研究报道。

一、研究对象

对２０１４年４月至２０１７年５月在南京鼓楼医院 生殖中心行常规体外受精（ＩＶＦ）单分裂胚移植的患 者资料进行回顾性分析。患者纳入标准：
（１）因盆腔 输卵管因素行ＩＶＦ助孕；
（２）常规ＩＶＦ 周期；
（３）获卵数为５～１５枚；
（４）月经 第３日 ＦＳＨ＜１２ Ｕ／Ｌ；
（５）女方年龄＜４０岁；（６）周期数＜２个；
（７）常规促 排卵方案。

排除标准：
（１）ＰＧＳ／ＰＧＤ 周期；
（２）供 卵周期；
（３）男性因素不育；
（４）移植日内膜＜８ｍｍ。 根据第３天移植胚胎的卵裂球数目分为８～９ 细胞组（ｎ＝１６８）、１０～１１细胞 组（ｎ＝３６）、１２～１６ 细胞组（ｎ＝３０），且１０～１１细胞 组、１２～１６细胞 组 中均无符合优质胚胎筛选条件的８～９细胞胚胎。

二、研究方法

１．ＴＬＩ系统：本研究所采用的时差成像系统是 ＰｒｉｍｏＶｉｓｉｏｎＴＬＩ（Ｖｉｔｒｏｌｉｆｅ，瑞典），它是 将 培 养 箱与胚胎倒置显微镜相结合，通过数据线将胚胎发 育过程中所采集到的图片传输到培养箱外的显示器 上，拍照 频 率 为５ｍｉｎ／次，能够 有 效 地 监 测 胚 胎 发 育的整个过程。此培养系统有自己专用的集合培养 皿（ＷＯＷ），ＷＯＷ 是一种９孔培养皿，每个孔都有 自己独立的数字编号，便于胚胎学家区分。

２．配子的采集与胚胎培养：采用常规促排卵方 案，Ｂ超监测 卵 泡 生 长，待 主 导 卵 泡 直 径 达 到１８～ ２０ｍｍ后注射 ＨＣＧ（珠海丽珠制药），３６ｈ后行阴道 Ｂ超引导下卵泡穿刺取卵术。获卵３ｈ后，采用短时 受精法，将采集到的人卵母细胞与精子按１∶１００００ 的比例混合加入ＩＶＦ（Ｖｉｔｒｏｌｉｆｅ，瑞典）微滴中，共同 孵育５ｈ后机械剥除颗粒细胞，通 过 观 察 第 二 极 体 是否释放来判断受精情况，之后将受精卵转移至含 有 Ｇ１（Ｖｉｔｒｏｌｉｆｅ，瑞典）培养液的 ＷＯＷ 集合培养皿中，置于 ＰｒｉｍｏＶｉｓｉｏｎＴＬＩ系统 培 养 观 察 到 第３ｄ 进行移植。

３．胚胎评估：根据Ｉｓｔａｎｂｕｌ共识对分裂期胚胎 质量进行评分。以授精时间为起点，通过时差成像 系统记录胚胎发育过程中的卵裂模式与时间参数， 采用本中心建立的胚胎筛选模型进行胚胎筛选。 移植胚胎筛选范围是：卵裂模式为正常、不均或非轴 性卵裂，且时间参数符合ｓ２＜０．５０ｈ （ｓ２＝ｔ４－ｔ３， 即停留在３细胞阶段时间）、ｔ５＜４８．９３ｈ （５细胞分 裂时间）。如该患者无符合上述筛选条件的胚胎，则 不纳入本研究范围。

４．移植与妊 娠 结 局

判 定：单胚胎移植周期中， 在 ＴＬＩ系统中培养到第３天，优先移植符合筛选条 件的８细胞胚胎，若无则选取符合筛选条件的卵裂 速度较快 的 胚 胎（≥９ 个 细 胞）移植后常规黄体支 持，２周后检测血 ＨＣＧ 当血 ＨＣＧ＞５Ｕ／Ｌ，４～６周 Ｂ超检查见孕囊及胎心为临床妊娠。 三、统计学分析 采用ＳＰＳＳ１７．０统计学软件对数据进行分析，所有计量资料采用 （ｘ珚±ｓ）表示，计 数 资 料 采 用 率 （％）表示，上海博迅得出组间数据采用ｔ检验进行比较，各组间率 采用卡方检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

5 结 果 

床资料与结局 ８～９细胞组、１０～１１细胞组和１２～１６细胞组 ３组 患 者 的 年 龄、体 重 指 数 （ＢＭＩ）、获 卵 数、基 础 ＦＳＨ、基 础 ＬＨ、内 膜 厚 度 等 均 无 显 著 差 异 （Ｐ＞ ０．０５）；３组间种植率、流产率、活产率亦无显著差异 （Ｐ＞０．０５）。 患者一般临床资料与结局 奇数组和偶数组两组患者的年龄、ＢＭＩ、获卵数、 基础ＦＳＨ、基础 ＬＨ、内膜厚度等均无显著差异（Ｐ＞ ０．０５）。两组临床结局比较，偶数组的种植率、活产率 均显著高于奇数组 （Ｐ＜０．０５）。偶数组的流产率低 于奇数组，但差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。