采 用酶解法水解动物血液制备生物活性肽成为最常用的方 法,具有价格低廉、易转化等优点。羊血营养价值丰富,但 目前对水解羊血清蛋白的研究相对较少,特别是利用碱性 蛋白酶法水解羊血清蛋白制备生物活性肽的研究鲜见报 道。本研究采用碱性蛋白酶水解羊血清蛋白,通过测定酶 解温度、水解时间、水解pH值和加酶量对羊血清蛋白水解 度的影响。721型紫外分光光度计(惠普有限公司)、TGL-16M高 速台式冷冻离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司)、 JA2003N电子天平(上海精密科学仪器有限公司)、HWS28 型电热恒温水浴锅(上海一恒科技有限公司)、PB-10型精 密pH计(Sartorius公司)。
pH值通过影响碱性蛋白酶分子活性部位上相关基团 解离程度,进而影响酶的作用,在最适pH时,酶分子上 活性基团的解离状态与底物结合最佳,pH 值高于或低于 最适pH时,酶活性基团解离程度降低,影响酶和底物的结 合能力及酶的反应速率。因此,确定碱性蛋白酶水解羊血 清蛋白的最适pH值为11。各响应面随着各个因素增大,羊血 清蛋白的 DH 均呈现先升后降的趋势,羊血清蛋白的 DH 存在最大值;通过分析各因素之间相互作用对DH的影响, 确定碱性蛋白酶水解羊血清蛋白的最佳范围。