一恒对于灵芝诱变菌株的抗氧化能力优化。

    利 用 常 压 室 温 等 离 子 体（ａｔｍｏｓ－ ｐｈｅｒｉｃｒｏｏｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｐｌａｓｍａ，ＡＲＴＰ）诱变灵芝出发菌株 Ｇ０１５７的原生质体，获得了１０３株诱变 菌株。基于上述诱变菌株液体发酵菌丝体水提物的抗氧化能力，从中筛选抗氧化能力强的 优良菌株，并测定这些优良菌株菌丝体水提物中多糖、多酚含量，研究其与抗氧化能力间的相关性。ＨＷＳ－２４电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）；ＭＳ１０５ＤＵ 分析天平（苏州Ｓｃｉｅｎｃｅ仪器 有限公司）；Ｂｉｏｔｅｋ－ＳｙｎｅｒｇｙＨＴ酶标仪（美国 Ｂｉｏ－Ｔｅｋ公司）；ＺＷＹ－２１０２双层恒温培养振荡器（上海智 城分析仪器制造有限公司）；５８１０Ｒ 冷冻离心机（德国 Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司）。

    铁离子还原能力测定（ＦＲＡＰ法）：根据 ＢＥＮＺＩＥ 等的方法稍作改动。以 ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ 为参照 物，考察各菌株菌丝体水提物的铁离子还原能力。取０．５ｍＬ样品溶液置于具塞试管中，加入４．５ｍＬ ＦＲＡＰ反应液，混匀，避光反应１０ｍｉｎ，在５９３ｎｍ 处测定反应液的吸光度值。以０、１００、２００、３００、４００、 ５００、６００μｍｏｌ·Ｌ－１ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ 溶液为标准溶液绘制标准曲线。通过标准曲线计算样品的铁离子还 原能力，即 ＦＲＡＰ值。　各诱变菌株的 ＤＰＰＨ 自由基清除能力测定结果。在１ｍｇ·ｍＬ－１时，出发菌株菌丝体 水提物的 ＤＰＰＨ 自由基清除率仅为３．５４％，阳性对照 ＶＣ清除率达到８７．０６％，ＡＲＴＰ诱变菌株菌丝体 水提物的 ＤＰＰＨ 自由基清除率均小于４５％，多数诱变菌株的 ＤＰＰＨ 自由基清除率与出发菌株无显著 差异，仅部分诱变菌株的清除率显著高于出发菌株 Ｇ０１５７，Ａ１４、Ａ１９、Ａ２２、Ａ２３、Ａ２８、Ａ４０、Ａ５２、Ａ７８、 Ａ８１、Ａ８５、Ａ８６、Ａ８８、Ａ９８、Ａ１０３等 １４个诱变菌株的清除率达到１０％以上，其中 Ａ１４和 Ａ１９等２个诱 变菌株达到４４．６１％和４３．７９％。因此，选择这１４个菌株为初筛获得的优良诱变菌株。