共生菌的筛选之恒温培养箱的应用

材料与方法

SVE-6A1 超净工作台：新加坡 ESCO 公 司；GHP-9050 恒温培养箱：上海一恒仪器股份有限公司；DM 2500 显微镜：德国 LEICA 公 司；HV-110 高压灭菌器：日本 Hirayama 公司； U410-86 超低温冰箱：英国 NEW BRUNSWICK 公司；U-2900 紫外分光光度计：日本 Hitachi 公司；Vitek 2 Compact 全自动微生物分析系统， YST 鉴定卡，ANC 鉴定卡：均购自法国梅里埃 公司。样品采集：采集不同地区的自制发酵面包、 面团，共 5 份样品。低温冷链带回实验室，较短 的时间内及时进行菌株分离。 样品处理：取出采集样品浸泡在 0.9% 生理 盐水中，用无菌玻璃棒研碎样品，分别在 3h、6h 后蘸取浸泡液划线分离。

结果与讨论

从额尔右纳河流域 3 个地区共采集了 5 份传 统列巴面团样品，经分离共获得菌株 30 株，其 中包含 14 株乳酸菌和 16 株酵母菌。筛选活力较 好且能稳定传代的 8 株酵母菌和 7 株乳酸菌进行 形态学观察、生物学鉴定，并从中筛选出具有潜 在共生的菌株。酵母菌在 YPD 平板培养基上呈现乳白色圆 形菌落，菌落直径 0.91 ～ 3.28mm 大小不等、表 面光滑且边缘整齐（个别边缘不整齐）、中间凸 起，不透明或半透明。梅里埃 Vitek 2 Compact 全自动微生物分析系 统，可在较短的时间内鉴定菌种，酵母菌 YST 鉴 定卡可在 20h 内出具详细的鉴定分析报告。同样，乳酸杆菌 ANC 鉴定卡要求鉴定可信 度在 85% ～ 99% 之间，经鉴定，7 株乳酸菌的鉴 定可信度均大于 90%，是可接受的鉴定结果。目 前对乳酸菌的鉴定最常用的方法是 16S rDNA 测 序法，分子生物学方法虽然快速，但所需仪器和 试剂昂贵，检测成本较高。

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