拟 对昭通金江青花椒总生物碱的体外抑菌活性进行研 究,以期为新型天然防腐剂的开发提供实验依据,也 为金江青花椒的精深加工提供理论依据,共同助力 金江青花椒产地脱贫攻坚。青花椒:昭通市鲁甸县花椒,烘干至恒重,粉碎 后过 0.250 mm 孔径筛,于干燥器中避光保存;营养 肉汤培养基、营养琼脂固体培养基、PBS 缓冲液, Solarbio;金黄色葡萄球菌显色培养基,海博生物; ATP 含量测定试剂盒,南京建成生物工程研究所; TD-400 台式低速自动平衡离心机,上海佑科仪器 仪表有限公司;DHP-9082 电热恒温培养箱,上海一 恒科学仪器有限公司;P1000 型移液枪,大龙兴创实 验仪器(北京)股份公司。
将青花椒总生物碱按 1×MIC 的比例加入对数 期的金黄色葡萄球菌菌悬液培养基中。以无菌水作 空白对照,将菌液和培养基按 1∶1 比例混匀后作为 阳性对照。设定取样时间间隔为 1 h,将取出的样 品在 6 000 r/min 下离心 10 min,用 PBS 洗涤并重悬 菌体三次,接着,在 300 W,间隔 1.1 s 的条件下破碎 细胞,随后于 8 000 r/min 冷冻离心 10 min,吸取上 清液,最后,参照 ATP 测试盒的测定方法检测样 品中 ATP 的含量。